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Diclofenacnatrium kopen hagianum (5% (vol/vol) wt) in distilled water (0.75g/l) were used to prevent the occurrence of osmotic diuresis (4). The rats were divided into 4 groups [n=9/group] by randomization with the sheet (5). This drug was administered, orally or intraperitoneally, for 5 consecutive days. At the end of each 5 days, blood samples were taken from the tail vein before and after administration for determination of plasma Venlafaxine 37.5 mg coupon concentrations all 4 drugs. After 10 min, 100% (vol/vol) ethanol (0.3%) solution was added to any blood sample collected from the tail vein, prior to drug injection. Blood samples collected into tubes at the time of drug administration Diclofenac 100mg $69.54 - $0.39 Per pill were centrifuged (4Ã—10 min, 4Â°C) and the plasma was immediately discarded. Blood samples were then collected and stored at âˆ’80Â°C until analysis. Plasma and serum levels of cortisone, glucocorticoids, and noradrenaline were determined analytically by gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS) or an internal standard (0.1 ng/ml) (8). All other samples were handled by a blinded laboratory technician. Measurement of testosterone (T) and cortisol (cortisol) in plasma samples was performed on a Clinical Chemistry Reference Laboratory (Dade Behring, Coral Gables, FL). Plasma samples were separated on a TLC plate (Tecan Diversified Labelling, Grand Island, NE). The internal standards were tested on a GC/MS analytical apparatus. T levels were measured using the following method (8): Briefly, 100 Î¼L of the aliquot sample (100 Î¼L original volume) was added to a 250 Î¼L GC column, then the mixture was eluted with 200 Î¼L of a 1% ammonium sulfate solution. Samples were analyzed by GC/MS. Cortisol (cortisol) was measured in 200 Î¼L samples with the following chemical protocol: 200 Î¼L sample was added to a 2.5 mL 96-well assay plate, followed by a 50 Î¼L initial addition of the internal standard (0.1 ng/ml) and three elution steps: (i) 200 Î¼L sample was added to the second internal standard (0.1 ng/ml); (ii) 50 Î¼L of the resulting eluted sample was added to a third standard of 100 Î¼L; and (iii) 50 Î¼L of the resulting eluted sample was added to a third standard of 100 Î¼L. The samples were then analyzed by GC/MS. The results were corrected for mass of the standard (8). results indicate that the standard amount for testosterone was 0.053 ng/ml. Cortisol determined using a radioimmunoassay standard for cortisol: 0.2 mg/ml of cortisone in 0.9% sodium chloride was added to an equal volume of distilled water, then immediately stored at âˆ’20Â°C until it was assay. The results indicated that internal standard amount for cortisol was 0.2 mg/ml. Effects of glucocorticoids on reproductive system and behavior of female rats Animals were divided into two groups of six each: group 1: male rats (n=8) treated with 100 mg/kg/day (1.1 mg/kg/day) corticosterone (n=9); and group 2: same as 1 but with 100 mg/kg/day (1.1 mg/kg/day) dexamethasone (n=9). The rats were housed in cages (6 Ã— 8 10 cm) with standard tap water and 2 h light/dark cycle. The lights were left on at 5:00 AM and 11:00 PM during the dark period. animals were allowed to freely wander during all experimental procedures (7). Stereological recording of vaginal discharge female rats Sexually mature (20â€“34 g; n=5) were divided into three groups (sex: virgin-female (VF), virgin-male (VM), and mated-female (MF), which was used as a control group, by randomization with the sheet. Testosterone (T) was administered orally or intraperitoneally (i.p.) for 5 consecutive days to groups of rats (n=6/group). At the end of each 5 days, mL 0.1 N HEPES were added to the vaginal, but not tail, of VF and VM test animals. After 5 min, 100% (vol/vol) ethanol (0.3%) solution was added to each samples. The samples were centrifuged (4Ã—10 min, 4Â°C) and the plasma samples were immediately collected. The plasma was stored at âˆ’80Â°C until analysis. After 10)